1. 簡述激光共焦掃描顯微鏡與普通光學顯微鏡成像方式的區别和優缺點
2. 與普通熒光顯微鏡相比激光共聚焦優勢在哪
3. 熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡的區别

一(yī)、簡述激光共焦掃描顯微鏡與普通光學顯微鏡成像方式的區别和優缺點

一(yī)、普通生(shēng)物(wù)顯微鏡由3部分(fēn)構成，即：①照明系統，包括光源和聚光器；②光學放(fàng)大(dà)系統，由物(wù)鏡和目鏡組成，是顯微鏡的主體(tǐ)，爲了消除球差和色差，目鏡和物(wù)鏡都由複雜(zá)的透鏡組構成；③機械裝置，用于固定材料和觀察方便。優點：操作簡便，制樣方便。

二、激光共聚焦掃描顯微鏡，用激光作掃描光源，逐點、逐行、逐面快速掃描成像，掃描的激光與熒光收集共用一(yī)個物(wù)鏡，物(wù)鏡掃描激光的聚焦點，也是瞬時成像的物(wù)點。由于激光束的波長較短，光束很細，所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分(fēn)辨力，大(dà)約是普通光學顯微鏡的3倍。系統經一(yī)次調焦，掃描限制在樣品的一(yī)個平面内。調焦深度不一(yī)樣時，就可以獲得樣品不同深度層次的連續圖像，這些圖像信息都儲于計算機内，通過計算機分(fēn)析和模拟，就能顯示細胞樣品的立體(tǐ)結構，實現三維成像與解析，獲得精細的細胞骨架、染色體(tǐ)、細胞器和細胞膜系統的三維圖像。優點：分(fēn)辨率高于普通光學顯微鏡；能對樣品進行連續無損光學切片，并去(qù)除了雜(zá)散光的影響，增加了圖像的清晰度。

二、與普通熒光顯微鏡相比激光共聚焦優勢在哪

與普通熒光顯微鏡相比激光共聚焦優勢有：

1、多重染色

1)多重染色時，各染料之間的cross-talk較少。

2)可使用cy5染料 cy5的激發波長是645nm, 熒光emission波長是670-680nm, 人眼的可見光 波長是390-750nm.

2、z軸上的分(fēn)解能高。

1)可了解組織的3d結構。

2)可觀查被染上熒光的物(wù)質在細胞裏的分(fēn)布：例如，是在細胞膜上還是在細胞核裏。

3)即使組織标本較厚，也可獲得鮮明的畫像。

3、高畫質

1)通過調節pin-hole，不但可提高z軸上的分(fēn)解能，也可提高x-y軸上的分(fēn)解能。

2)可以在光學和電(diàn)子兩個水平調節對比度，因此可以從低對比度組織标本，拍攝到高對比度的圖像。

三、熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡的區别

激光共聚焦顯微鏡是在在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置，使用紫外(wài)光或可見光激發熒光探針。主要應用在生(shēng)物(wù)領域及醫學研究中(zhōng)，能得到細胞或組織内部微細結構的熒光圖像，在亞細胞水平上觀察諸如ca2+ 、ph值，膜電(diàn)位等生(shēng)理信号及細胞形态的變化，是形态學，分(fēn)子生(shēng)物(wù)學，神經科學，藥理學，遺傳學等領域中(zhōng)新一(yī)代強有力的研究工(gōng)具。

還有一(yī)種區别于生(shēng)物(wù)學領域的激光共聚焦顯微鏡。它是以共聚焦技術爲原理，是用于對各種精密器件及材料表面進行微納米級測量的檢測儀器。

基于轉盤共聚焦光學系統，在材料生(shēng)産檢測領域中(zhōng)能對各種産品、部件和材料表面的面形輪廓、表面缺陷、磨損情況、腐蝕情況、平面度、粗糙度、波紋度、孔隙間隙、台階高度、彎曲變形情況、加工(gōng)情況等表面形貌特征進行測量和分(fēn)析。